广州mRNA_文奇生物性致于简,精致于臻

凝胶迁移或电泳迁移率实验   

 

背景知识:

 

凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。

 

技术知识:

 

其基本原理是蛋白质可以与末端标记的核酸探针结合,电泳时这种复合物比无蛋白结合的探针在凝胶中泳动的速度慢,即表现为相对滞后。该方法可用于检测DNA结合蛋白、RNA结合蛋白,并可通过加入特异性的抗体来检测特定的蛋白质,进行未知蛋白的鉴定。

 

应用范畴:

 

这一技术目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用,已经成为转录因子研究的经典方法。

 

1)用于研究特定的转录因子以及转录因子所结合的顺势作用元件。

 

2)用于研究与蛋白质相结合的DNA的序列的特异性。

 

3)评估突变对探针DNA与结合蛋白相互作用的影响。

 

4)用于研究DNA-foot printing。

 

您只需提供:

 

靶基因信息,生物素标记的探针,文献资料等。

 

我们提供:

 

EMSA实验原始胶片,电子图片,实验报告单等。

 

染色质免疫沉淀  

 

 

背景知识:

染色质免疫沉淀(ChIP)被用来研究细胞内DNA与蛋白质相互作用,具体来说就是确定特定蛋白(如转录因子)是否结合特定基因组区域(如启动子或其它DNA结合位点)——可能定义顺反组。ChIP还被用来确定基因组上与组蛋白修饰相关的特定位点(即组蛋白修饰酶的靶标)。

 

技术原理:

 

染色质免疫沉淀原理是在活细胞状态下固定蛋白质-DNA复合物,并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段,然后通过免疫学方法沉淀此复合体,特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段,通过对目的片断的纯化与检测,从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息。

 

重要意义与应用:

 

近年来,这种技术得到不断的发展和完善。采用结合微阵列技术在染色体基因表达调控区域检查染色体活性,是深入分析癌症、心血管疾病以及中央神经系统紊乱等疾病的主要通路的一种非常有效的工具。主要应用在组蛋白修饰酶的抗体作为“生物标记”、转录调控分析、药物开发研究、有丝分裂研究、DNA损失与凋亡分析等技术上。

 

您只需提供:

 

靶基因信息,相关的一抗,文献资料等

 

我们提供:

 

完整的ChIP实验报告单等。

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