佛山SCI_文奇生物实验班,培养高手来
质谱分析试验
背景知识:
质谱分析是一种测量离子荷质比(电荷-质量比)的分析方法。第一台质谱仪是英国科学家弗朗西斯·阿斯顿于1919年制成的。阿斯顿用这台装置发现了多种元素同位素,研究了53个非放射性元素,发现了天然存在的287种核素中的212种,第一次证明原子质量亏损。他为此荣获1922年诺贝尔化学奖。
技术原理:
其基本原理是使试样中各组分在离子源中发生电离,生成不同荷质比的带正电荷的离子,经加速电场的作用,形成离子束,进入质量分析器。在质量分析器中,再利用电场和磁场使发生相反的速度色散,将它们分别聚焦而得到质谱图,从而确定其质量。
质谱实验结果
重要意义与应用:
生物质谱可提供快速、易解的多组分的分析方法,且具有灵敏度高、选择性强、准确性好等特点,其适用范围远远超过放射性免疫检测和化学检测范围,生物质谱在检验医学中主要可用于生物体内的组分序列分析、结构分析、分子量测定和各组分含量测定。
您只需提供:
SDS-PAGE胶条(银染和考马斯亮蓝染色均可)。
我们提供:
原始质谱鉴定图谱,潜在蛋白信息,实验报告单等。
双向电泳技术
背景知识:
蛋白质组研究的发展以双向电泳技术作为核心。双向电泳由O. Farrell’s于1975年首次建立并成功地分离约1000个E.coli蛋白,并表明蛋白质谱不是稳定的,而是随环境而变化。双向电泳原理简明,第一向进行等电聚焦,蛋白质沿pH梯度分离,至各自的等电点;随后,再沿垂直的方向进行分子量的分离。目前,随着技术的飞速发展,已能分离出10000个斑点(spot)。当双向电泳斑点的全面分析成为现实的时候,蛋白质组的分析变得可行。
技术原理:
1、根据蛋白质的等电点(第一向)和分子量(第二向)的不同进行分离。
2、电泳后根据蛋白质的上样量对胶进行考马斯亮兰染色、银染或荧光染色,然后用相关软件对电泳图象进行分析。
主要应用:
2 凝胶中蛋白的检测
2 图像采集和分析
2 蛋白鉴定
2 分离蛋白质组所有蛋白
您只需提供:
新鲜且足量的样品(组织不少于500 mg,细胞不少于107),或提取的总蛋白(≥ 200 μl)。
我们提供:
原始SDS-PAGE胶,电子图片,分析差异点,实验报告单等。
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